Knudson médium pro orchideje

Knudson médium je umělé živné médium vyvinuté v roce 1946 americkým botanikem Lewisem Knudsonem, aby vyklíčila semena orchidejí a podpořila růst sterilních podmínek. Je to jedno z nejpoužívanějších médií pro pěstování orchidejí in vitro a je oblíbené pro laboratorní i domácí aplikace.

Co je Knudson Medium?

Orchideje přirozeně rostou v symbióze s mykorhizálními houbami, které poskytují základní živiny. Reprodukce této symbiózy v laboratorních podmínkách je však nemožné. Knudson médium bylo vyvinuto jako náhrada bohatá na živiny, která dodává všechny základní prvky potřebné pro klíčení semen a růst sazenic.

Složení Knudsonova média

Standardní vzorec zahrnuje:

• Cukr: Primární zdroj energie.
• Minerální soli:
  • Dusičnan draselný (Kno₃) - zdroj dusíku.
  • Sulfát hořečnatého (MGSO₄) - poskytuje hořčík a síru.
  • Fosfát dihydrogen draselné (KH₂PO₄) - dodává fosfor a draslík.
  • Chlorid vápenatý (CaCl₂) - zdroj vápníku.
• Vitaminy:
  • Kyselina nikotinová, thiamin a pyridoxin pro aktivaci metabolických procesů.
  • Železo, zinek, mangan a další prvky nezbytné pro vývoj tkáně.
  • Agar-agar vytvoří pevné médium, zabrání potopení semen nebo sazenic.
• Stopové prvky:
• Gelling Agents:

Výhody používání Knudsonova média

1. Stimuluje klíčení semen:
   • Poskytuje všechny potřebné živiny pro klíčení a nahrazuje potřebu plísňové symbiózy.
2. Sterilní prostředí:
   • Vytváří ideální podmínky pro růst bez rizika bakteriální nebo plísňové kontaminace.
3. Optimální růstové podmínky:
   • Podporuje vývoj sazenic, dokud nejsou připraveni k transplantaci do substrátu.
4. Vhodné pro různé druhy orchidejí:
   • Vzorec může být upraven tak, aby vyhovoval specifickým potřebám různých typů orchidejí.

Aplikace Knudsonova média

1. Klíčení semen:
   • Semena orchidejí jsou sterilizována (obvykle s roztokem chlornanu sodného).
   • Sterilní semena jsou umístěna na povrch živného média v Petriho miskách nebo testovacích zkumavkách.
2. Růst sazenic:
   • Médium podporuje vývoj sazenic, dokud se neobjeví listy a počáteční kořenové systémy.
3. Transplantace do substrátu:
   • Jakmile sazenice dosáhnou vhodné velikosti, jsou transplantovány do vhodného substrátu (např. Bark, Sphagnum Moss).

Jak připravit Knudson médium?

Složky (příklad pro 1 litr):

• AGAR-AGAR: 10 g
• Cukr: 20 g
• KH₂PO₄: 250 mg
• Mgso₄ · 7H₂o: 250 mg
• CaCl₂ · 2H₂o: 250 mg
• Kno₃: 500 mg
• Vitaminy (thiamin, kyselina nikotinová): každý 1 mg
• Mikroelementy (např. Feso₄): 1–2 mg
• Destilovaná voda: 1 l

Kroky:

1. Rozpusťte všechny komponenty v destilované vodě.
2. Přidejte agar a agar a teplo, abyste jej plně rozpustili.
3. Nalijte roztok do sterilních kontejnerů (Petriho nádobí, zkumavky).
4. Sterilizujte médium v ​​autoklávu nebo vodní lázni (15 minut při 121 ° C).
5. Ochlaďte médium, aby bylo možné ztuhnout.

Tipy pro používání Knudson Medium

1. Udržovat sterilitu:
   • Pracujte ve sterilních podmínkách, abyste zabránili kontaminaci.
2. Monitorovací teplota:
   • Udržujte kultury při +20–25 ° C.
3. Poskytněte odpovídající světlo:
   • Zajistěte měkké, rozptýlené osvětlení po dobu 12–14 hodin denně.
4. Transplantace:
   • Přeneste sazenice na substrát, jakmile jsou dostatečně velké pro nezávislý růst.

Závěr

Knudson médium je kritickým nástrojem pro úspěšné klíčení semen orchidejí a kultivaci zdravých sazenic. Poskytuje dokonalou rovnováhu živin pro růst, což eliminuje potřebu plísňové symbiózy. Toto médium je ideální pro šíření vzácných a dekorativních druhů orchidejí, ať už v laboratoři nebo doma.